Гепатоген C является вирусом, вызывающим гепатит C, инфекционное заболевание печени. Количественная аналитическая чувствительность 200 уопий (МЕ/мл) указывает на минимальное количество вируса в образце, которое можно обнаружить с высокой точностью и надежностью. Это значение играет ключевую роль в диагностике и мониторинге лечения, позволяя оценить вирусную нагрузку и эффективность терапии.
В случае обнаружения вируса на уровне 200 уопий и выше, это может свидетельствовать о наличии активной инфекции, что требует дальнейших медицинских действий. Низкая аналитическая чувствительность обеспечивает более точное выявление вируса, что важно для своевременного принятия решения о лечении и предотвращении осложнений.
- Гепатоген C — вирус, вызывающий хронический гепатит и другие заболевания печени.
- Количественная аналитическая чувствительность 200 уопий обозначает минимальное количество вирусных частиц, которые могут быть обнаружены в пробе.
- Этот показатель важен для диагностики и мониторинга лечения заболевания.
- Чувствительность 200 уопий позволяет выявлять инфекции на ранних стадиях и оценивать эффективность терапии.
- Регулярное тестирование на вирус гепатита C помогает предотвратить осложнения и улучшить прогноз для пациента.
1) Вид биоматериала: ЦЕЛЬНАЯ КРОВЬ (ЭДТА) Тип пробирки, оттенок крышки: Фиолетовая ПЦР и ГИ500 мкл.
Подготовка к исследованию:
Кровь берут натощак, используя вакуумную пробирку с К2ЭДТА (фиолетовая крышка), заполняя пробирку ровно до отметки, указанной на её этикетке. После забора крови пробирку с К2ЭДТА необходимо аккуратно перевернуть 8 – 10 раз на 180˚ для однородного смешивания с антикоагулянтом (избегать встряхивания). Необходимо также указать на пробирке: ф. И. О. пациента, номер образца и номер лечебного учреждения (данные должны соответствовать тем, что указаны в направлении).
Условия хранения и транспортировки:
Перед тем как курьер заберет образец, пробирку нужно хранить при температуре +2°C. +8°C – не более 6 часов с момента забора. Замораживать образцы цельной крови строго запрещено! Доставка в лабораторию должна осуществляться в тот же день, когда был взят образец.
Примечание:
Из биоматериала одной полной пробирки (в объеме 4 мл) может быть выполнено не более 7 (семи профилей) молекулярно-генетических исследований!
Стабильность аналитов
Температура хранения: +2°C. +8°C – 24 часа.
Вирус гепатита С имеет множество генотипов, определение которых критически важно для подбора эффективной противовирусной терапии, прогнозирования течения болезни и возможных осложнений.
Подготовка к исследованию
К специальной подготовке к тестированию требования не предъявляются. Рекомендуется сдавать кровь на голодный желудок, желательно в утреннее время. Употребление соков, чая и кофе перед анализом может сказаться на результатах.
- Перед обследованием необходимо исключить стрессовые и физические нагрузки (не следует посещать спортзалы, бассейны и сауны);
- За 24 часа до взятия крови нужно отказаться от алкоголя (включая пиво);
- В течение часа перед тестированием курить запрещено;
- Перед анализом желательно проконсультироваться с лечащим врачом о влиянии принимаемых препаратов на результаты;
- В день забора крови по согласованию с врачом следует временно прекратить прием тех лекарства, которые могут исказить результаты, а если это невозможно, предупредить лабораторию;
- Перед забором пробы рекомендуется спокойно посидеть в течение 10-15 минут.
Важно! Кровь не следует забирать после внутримышечных и внутривенных инъекций, физиотерапевтических процедур, массажа, переливания крови, флюорографии, кольпоскопии, гастроскопии, биопсии, пункции, рентгеновских, мануальных, инструментальных, ректальных, ультразвуковых исследований, электрокардиограммы и других медицинских манипуляций.
Гепатит C — это вирусное заболевание, которое может приводить к тяжелым последствиям для печени. Когда я говорю о количественном анализе вируса гепатита C с аналитической чувствительностью 200 МО/мл, я имею в виду, что метод, используемый для определения вирусной нагрузки, способен выявлять вирус в крови только при его концентрации 200 международных единиц на миллилитр и выше. Это очень важный показатель, поскольку он позволяет оценить активность инфекции и мониторить эффективность лечения.
Важно понимать, что если уровень вирусной нагрузки ниже 200 МО/мл, данный анализ не сможет его определить, что может привести к недооценке серьезности состояния пациента. В клинической практике такие данные требуют аккуратного подхода, так как наличие вируса даже при низких уровнях может продолжать вызывать повреждение печени и другие осложнения. Таким образом, даже при негативном результате количественного анализа, важно проводить дополнительные исследования для оценки общего состояния здоровья пациента.
Клиническое значение результата с такой чувствительностью заключается в том, что он помогает врачам принимать решения о стратегии лечения. Например, если уровень вирусной нагрузки высок, это может указывать на необходимость более агрессивной терапии или изменения подхода к лечению. В то же время, если вирусная нагрузка успешно снизилась до уровня, не превышающего 200 МО/мл, это может быть признаком эффективной терапии, но требует регулярного мониторинга для предотвращения рецидивов заболевания.
Важно! При проведении исследований в динамике сдачу биоматериала рекомендуется осуществлять в одной и той же лаборатории, желательно в одно и то же время суток, максимально соблюдая условия подготовки к тестированию (режим питания, физических нагрузок и т. д.)
Показания к исследованию
- при положительном результате теста на наличие РНК вируса гепатита С в крови;
- для формирования схемы лечения;
- для точной оценки эффективности терапии.
Внимание! Управление тестом не используется в качестве первичной пробы для выявления вируса гепатита С или диагностики HCV-инфекции.
Для получения точного результата важно правильно подготовиться к анализу:
- за сутки до сбора крови исключить алкоголь, медикаменты, жирную и копченую пищу, а также избегать физических нагрузок;
- за час до сдачи крови не пить кофе, крепкий чай, газированные напитки, а также не курить;
- нельзя сдавать кровь после массажа, биопсии, кольпоскопии, гастроскопии, лазерной эпиляции, солярия, рентгена, ультразвука, физиотерапии, мануального и ректального осмотра;
- за час до исследования следует избегать стрессовых ситуаций.
Все перечисленное может привести к искажению результатов анализа. Противопоказаний данной процедуре нет.
Методика тестирования
Анализ проводится в соответствии с четко установленным алгоритмом:
- биоматериал помещается в пробирку. В кровь добавляются специальные вещества, ДНК или РНК фрагменты, а также свободные нуклеотиды;
- состав нагревается до 95 градусов, чтобы разъединить спирали ДНК;
- после нагрева материал охлаждается. На этапе охлаждения полимераза связывается с отдельными нуклеотидами, что возможно только на одиночной цепочке ДНК, так как на двойной спирали этот процесс не проходит;
- следующий этап — повторное нагревание, которое вновь разделяет нуклеотиды. Этот постоянный процесс увеличивает количество генов гепатита С;
- финальным этапом является очистка — частицы разделяются с помощью электрофореза, в результате чего происходит отделение на молекулы.
Такой анализ позволяет выявить вирус в крови и его тип.
Краткое описание исследования «Количественное определение РНК вируса гепатита С методом ПЦР [вирусная нагрузка] в сыворотке крови»
Гепатит С – это вирусное заболевание печени, которое часто переходит в хроническую форму (55-85% инфицированных). Вирус передается парентерально (использование загрязненных игл, шприцев и других медицинских инструментов), реже – половым путем, а Вертикальным путем от инфицированной матери ребенку (4-6% случаев).
Гепатит С демонстрирует высокую геномную вариабельность, в процессе инфекции вирус быстро мутирует, что, вероятно, объясняет его способность уклоняться от иммунных механизмов защиты и частоту хронизации инфекции. Хроническая инфекция вирусом гепатита С проявляется, с одной стороны, постоянным размножением вируса, а с другой — активным, но недостаточным иммунным ответом организма. В отличие от гепатита B, антигены вируса гепатита C не обнаруживаются в крови в достаточном количестве (обычно их находят в образцах печени). Это ограничивает возможности лабораторной оценки течения и активности инфекции. Современный диагноз гепатита C основывается на прямом обнаружении вирусной РНК методом ПЦР и выявлении антител anti-HCV.
Количественная оценка содержания РНК вируса гепатита C в клинических образцах важна для оценки эффективности противовирусной терапии и прогностически значима для определения вероятности хронизации заболевания. В данном исследовании определение РНК вируса гепатита C в сыворотке крови проводится методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в реальном времени.
По рекомендациям Всемирной организации здравоохранения, диагноз гепатита С может быть установлен на основании тройного обнаружения РНК вируса гепатита C в сыворотке крови при отсутствии остальных маркеров. На остром этапе гепатита вирусная РНК обнаруживается в крови через 1-2 недели после инфицирования, что происходит задолго до формирования антител к вирусу.
Аналитические показатели:
- определяемый фрагмент – специфический участок РНК вируса гепатита C;
- специфичность определения – 100%;
- чувствительность исследования – 60 МЕ/мл;
- линейный диапазон: 10² — 1х10⁸ МЕ/мл.
С какой целью количественно определяют РНК вируса гепатита С методом ПЦР [вирусная нагрузка] в сыворотке крови
Определение РНК вируса гепатита C в сыворотке крови используется для мониторинга пациентов с хронической инфекцией вирусом гепатита С для оценки вирусологического ответа на ранних стадиях антивирусной терапии.
- Величко В. А. Лабораторная диагностика вирусных гепатитов В и С. – 2020.
- Клинические рекомендации. Острый гепатит C у детей. – 2022.
- Клинические рекомендации. Хронический вирусный гепатит С. – 2021.
- Методические рекомендации. Хронический вирусный гепатит С (ХВГС) у детей. – 2021.
- Семенов В. М. и др. Разработка тест-системы для диагностики вирусного гепатита С методом ПЦР в режиме реального времени //Достижения фундаментальной, клинической медицины и фармации. – 2018. – С. 122-124.
- Kiani I. G. et al. HCV-RNA PCR positivity in HCV antibody negative patients undergoing haemodialysis //Journal of Ayub Medical College Abbottabad. – 2018. – Т. 30. – №. 3. – С. 397-400.
Подготовка
Как проводится трактовка результатов исследований?
По результатам выдаются качественные характеристики (отрицательный или положительный результат). При обнаружении вируса предоставляется количественное значение и характеристика степени заражения.
Расшифровка вирусной нагрузки при гепатите С осуществляется в международных единицах (МЕ/мл):
- высокая вирусная нагрузка — более 800 000 МЕ/мл;
- низкая вирусная нагрузка — менее 800 000.
В каждом случае уделяется внимание количеству копий: в первом случае — более 2 миллионов копий/мл, во втором — меньше. При высокой нагрузке предполагается активный воспалительный процесс. В таблице представлена более детальная интерпретация степени вирусной нагрузки.
| Степень | Вирусная нагрузка в МЕ/мл крови |
| низкая | от 600 до 30000 |
| средняя | от 30000 до 800000 |
| высокая | свыше 800000 |
Наиболее частое значение при первичном исследовании на фоне признаков гепатита — примерно 1 100 000 МЕ/мл. Результат считается положительным. Назначается весь комплекс терапии. Если обнаруживают от 400 000 ME и более, считается что вирус не просто присутствует, но и активно размножается, заражая окружающих. Небольшое снижение — показатель благоприятного прогноза на выздоровление.
Отрицательный результат и успешное лечение подтверждаются полным отсутствием РНК вируса гепатита C в крови. Это лечение признается надежным при повторных анализах с большими интервалами. Увеличение вирусной нагрузки после завершения курса и хорошие результаты анализа могут указывать на вероятность рецидива гепатита.
Если в заключении указано: «РНК ниже диапазона измерений», это означает, что генетический материал вируса присутствует, но его количество слишком мало, чтобы определить его точную величину данным методом. Подтвердить или опровергнуть результат можно исключительно методом полимеразной цепной реакции.
При положительном анализе на гепатит С у беременной с высокой вирусной нагрузкой существенно увеличивается риск передачи инфекции плоду от матери. В связи с этим необходимо решать вопрос о целесообразности сохранения беременности, так как принятие препаратов для лечения может привести к серьезным генетическим мутациям у ребенка.
Не следует пытаться трактовать результаты самостоятельно, для этого есть подготовленные специалисты
Возможны ли ошибки в заключении по анализу?
При резких колебаниях значений врач должен провести расшифровку анализа и учесть возможность ошибок. Это может быть связано с:
Обычно медицинские специалисты стараются отправлять на анализы в одну и ту же лабораторию. Повторное исследование позволяет более тщательным образом проверить полученные результаты.
Генотипирование вируса гепатита С (HCV) (генотипы 1а, 1в, 2, 3а/3б) методом ПЦР в крови, (качеств.)
Вирус гепатита С (ВГС) представляет собой миниатюрный сферический вирус, имеющий размер 55-65 нанометров и относящийся к семейству Flaviviridae. Этот вирус вызывает заболевание, известное как гепатит С. Структура ВГС включает в себя основную молекулу РНК, окруженную защитным белковым слоем, а также липидной оболочкой клеточного происхождения, в составе которой находятся два гликопротеина — E1 и E2, внедренные в липидную матрицу.
Гликопротеины E1 и E2 ответственны за инфицирование клеток и их удержание внутри. Геном HCV представлен одноцепочной РНК, содержащей 9600 нуклеотидов. Гепатит C классифицируется на основе структурных особенностей РНК, что приводит к выделению генотипов и субтипов. Всего различают шесть генотипов по одному критерию и одиннадцать — по другому.
Генотип можно охарактеризовать как группу вирусов, обозначаемую в медицине термином «квазивиды». Эти вирусы быстро развиваются и эволюционируют, меняясь стремительно и оставаясь невосприимчивыми к лекарственным препаратам.
Именно процессом «генотипирование» и объясняются сложности в разработке вакцины, которой на сегодняшний день попросту не существует в природе. Наиболее распространен в мире генотип 1 (40-80 %).
На территории Европы и России геномные типы вируса гепатита С встречаются в следующей последовательности: 1b, 3ав, 2. Геномы имеют существенные различия в различных странах и могут по-разному реагировать на интерфероновые препараты. Хронический гепатит С, ранее считавшийся неизлечимым, в наше время лечится с помощью современных противовирусных методов, что позволяет избавиться от вируса в клетках печени и предотвратить серьезные осложнения, такие как цирроз печени и рак печени.
Определение генотипа РНК вируса гепатита С является важным шагом для правильного назначения терапии и определения ее продолжительности, а также для прогноза успешности лечения. Генотип 1 имеет худший прогноз по сравнению с 2 и 3 генотипами. У пациентов с генотипом 1b хроническая форма инфекции HCV развивается в 90% случаев, тогда как у носителей генотипов 2a и 3a ситуация такова лишь в 35-50% случаев.
Для больных с первым и четвертым генотипами рекомендованы повышенные дозы интерферонов. Длительность лечения у таких пациентов должна составлять 48 недель даже в тех случаях, когда вирус не обнаруживается в крови более 24 недель. Если количество вирусных частиц не снижается на два порядка в течение 12 недель, это сигнализирует о неэффективности терапии, и необходимо ее пересмотреть.
Генотипы 2 и 3 хорошо поддаются терапии в 80 % случаев, обычно это занимает 24 недели. Лечение разрабатывается с учетом пола и возраста пациента, присутствующих у него симптомов, ранее проводимой терапии, структуры и функции печени, а также лабораторных показателей. К сожалению, есть вероятность повторного заражения вирусным гепатитом С другого генотипа из-за отсутствия перекрестного иммунного ответа и стойкого иммунитета.
Показания для проведения исследования:
- Определение необходимости лечения и прогнозирование развития заболевания.
- Планирование срока противовирусной терапии и дозировок препаратов.
- Оценка ожидаемой эффективности лечения.
- Решение о проведении биопсии печени.
Когда проводится это исследование?
- После нахождения РНК вируса гепатита С и перед началом вирусной терапии.
Что может повлиять на результаты? Генотип вируса гепатита С может не определяться при уровне вирусной нагрузки в крови менее 200 копий на миллилитр. Что означает результат «генотип не типируется»? Это может быть связано с двумя обстоятельствами — у вас нестандартный для нашего региона «экзотический» генотип HCV или низкая вирусная РНК в крови. В первом случае следует повторить анализ в другой лаборатории, которая имеет возможность определения генотипа 4. Если результат останется прежним, то лечение будет осуществляться по схемам, эффективным для генотипов 1, 2 и 3. Во втором случае необходимо пройти тест в диагностическом центре с более чувствительным оборудованием.
